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桑黄菌种的培养方法与流程 
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桑黄菌种的培养方法与流程,贵州鸿富鑫生态农业科技有限公司


本发明涉及食用菌培养领域,具体涉及一种桑黄菌种的培养方法。


背景技术


桑黄菌(phellinusigniarius),又称桑臣、桑耳、胡孙眼、桑黄菇,属担子菌亚门多孔菌科木层孔菌属,是一种珍贵的多年生药用真菌,由于其通常生长在桑属植物上,且子实体为黄褐色而得名“桑黄”。桑黄主要具有抗肿瘤、抗氧化、保肝、增强免疫力、抗菌、降低血脂、预防和治疗类风湿性关节炎、抑制尿酸和抗过敏等功效。在国内桑黄菌集中分布在黑龙江省东部乌苏里江与兴凯湖之间、西北地区陕西与甘肃交界处的“子午岭”自然保护区。另外,西南各省区亦有出产少量的桑树生桑黄菌。桑黄菌产量极为有限,有“森林黄金”之美称。桑黄菌,这味古老的中药,功效作用比较全面。其子实体入药,味微苦,能利五脏、软坚、排毒、止血、活血、和胃止泻,民间用以治疗淋病、崩漏带下、疮窟积聚、癖软、脾虚泄泻。日本《原色日本菌类图鉴》则记载桑黄菌可治偏瘫一类中风病及腹痛、淋病;《神农本草经》将桑黄菌描述为“久服轻身不老延年”;桑黄菌还有解毒、提高消化系统机能的作用;民间则认为桑黄菌可以提高肝脏机能,对治疗肝硬化有效。桑黄菌也因其良好的疗效而被誉为“菌种极品”。


随着桑黄的用量日益加大,特别是韩、日对我国野生资源掠夺式收购,野生桑黄资源的储备越来越少,因此发展人工桑黄培育是当前研究和开发的热点之一。


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技术实现要素:


本发明的目的在于克服现有技术的缺点,提供了一种桑黄菌种的培养方法,利用本方法培养的桑黄菌种菌丝粗壮,生长旺盛。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:


一种桑黄菌种的培养方法,包括如下步骤:


1)培养基配置:所述培养基各组分的质量百分比如下:以配置1l桑黄培养基为基准,需要桑枝木屑提取液5-15g/l、葡萄糖5-20g/l、魔芋精粉6-12g/l、马铃薯(去皮)150-250g/l、酵母粉2.0-6.0g/l、kh2po42.0-5.0g/l、mgso4·7h2o1.0-2.0g/l、琼脂6.0-12.0g/l;培养基的配制步骤为:


a.加热溶解:将马铃薯提取液倒入1000ml烧杯中,量取桑枝提取液5-15g/l加入烧杯中,添加水至1000ml,将烧杯中液体倒入锅中,分别加入葡萄糖5-20g,酵母粉2.0-6.0g/l、kh2po42.0-5.0g/l、mgso4·7h2o1.0-2.0g/l、琼脂6.0-12.0g/l,用电磁炉低档加热至沸腾,期间不断搅拌,防止糊底或溢出;


b.添加魔芋精粉:称取6-12g魔芋精粉,缓慢加入不断沸腾的液体培养中,不断搅拌,防止结块糊化,分装前保持沸腾状态;


c.ph值调节:在沸腾状态下测液体培养基的ph值,用10%naoh或稀盐酸调节ph值至5.5~7.5;


d.高压蒸汽灭菌:将配置好的液体培养基倒入2000ml的锥形瓶内,瓶口用棉塞塞住后,再用牛皮纸包裹棉线捆扎,放入灭菌锅中于0.15mpa高压条件下灭菌20min;


e.平板制备:在超净工作台上进行无菌操作,趁热先将灭菌完成后的培养基倒入无菌的培养皿中,厚度约1-1.5cm制成平板备用;


2)菌种接种:将步骤(1)中的培养基冷却至室温,待培养基凝固后,接入桑黄菌丝;


3)培养:将接种好菌丝的平板培养皿封口倒扣放入恒温箱中,在无光或弱光,20—26℃条件下进行培养,相对湿度控制在50%左右。


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进一步地,所述步骤(1)中桑枝木屑提取液的制备方法包括如下步骤:


a.取桑枝木屑100g备用;


b.将步骤a中的桑枝木屑放入锅中,加入1000ml纯水,用大火煮至沸腾,维持10-15min;


c.将步骤b中的液体趁热过滤,取滤液即得桑枝木屑提取液。


进一步地,所述步骤(1)中马铃薯提取液的制备方法包括如下步骤:


a.称取去皮土豆150-250g备用;


b.将称好的土豆切成小块放入锅中,加入水1000ml,在电磁炉上加热至沸腾,保持20-30min;


c.用2层纱布趁热过滤,取滤液待用。


本发明的有益效果为:


(1)本发明采用由桑枝木屑提取液、葡萄糖、魔芋精粉等成分制成的特异培养基,能有效促使桑黄菌丝粗壮,促进菌丝生长。


(2)利用本发明技术培养的桑黄菌丝,生长繁殖速度快,能够在25±1℃,无光条件下培养7天后就开始萌发,随后以平均2.2mm/d的速度生长繁殖。


(3)本发明添加的魔芋粉可作为替代琼脂用量,并提供桑黄菌丝对糖分的要求。


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图1为桑黄菌丝在培养基平板生长的照片。


具体实施方式


下面结合附图和实施例对本发明做进一步的描述,但是本发明的保护范围不局限于以下所述:


实施例1


一种桑黄菌种的培养方法包括,首先制备桑枝提取液和马铃薯提取液,桑枝提取液的制备方法为:称取桑枝木屑100g,放入锅中,加水1000ml,在电磁炉上加热至沸腾,维持10-15min,用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。制得桑枝提取液备用。马铃薯提取液制备方法为:称取去皮土豆200g,土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在电磁炉上加热至沸腾,维持20-30min,用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤液待用。将马铃薯提取液倒入1000ml烧杯中,量取桑枝木屑提取液10g/l加入烧杯中,添加水至1000ml,将烧杯中液体倒入锅中,分别加入葡萄糖9g/l、酵母粉5.0g/l、kh2po43.0g/l、mgso4·7h2o1.5g/l、琼脂8.0g/l,用电磁炉低档加热至沸腾,期间不断搅拌,防止糊底或溢出;称取9g魔芋精粉,缓慢加入不断沸腾的液体培养中,不断搅拌,防止结块糊化;在沸腾状态下测液体培养基的ph值,用10%naoh调节ph值至7.0;将配置好的液体培养基倒入2000ml的锥形瓶内,瓶口用棉塞塞住后,再用牛皮纸包裹棉线捆扎,放入灭菌锅中于0.15mpa高压条件下灭菌20min;在超净工作台上进行无菌操作,趁热先将灭菌完成后的培养基倒入无菌的培养皿中,厚度1.0cm制成平板备用;待培养基冷却至室温、培养基凝固后,接入桑黄菌丝;将接种好菌丝的平板培养皿封口倒扣放入恒温箱中,在无光或弱光,控制温度在25±1℃条件下进行培养,相对湿度控制在50%左右,培养7天后就开始萌发,随后以平均2.2mm/d的速度生长。

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实施例2


与上述实施例不同的是,马铃薯提取液制备方法为:称取去皮土豆150g,土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在电磁炉上加热至沸腾,维持20-30min,用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤液待用。将马铃薯提取液倒入1000ml烧杯中,量取桑枝木屑提取液5g/l加入烧杯中,添加水至1000ml,将烧杯中液体倒入锅中,分别加入葡萄糖5g/l、酵母粉2.0g/l、kh2po42.0g/l、mgso4·7h2o1.0g/l、琼脂6.0g/l,用电磁炉低档加热至沸腾,期间不断搅拌,防止糊底或溢出;称取9g魔芋精粉,缓慢加入不断沸腾的液体培养中,不断搅拌,防止结块糊化;在沸腾状态下测液体培养基的ph值,用10%naoh调节ph值至5.5;将配置好的液体培养基倒入2000ml的锥形瓶内,瓶口用棉塞塞住后,再用牛皮纸包裹棉线捆扎,放入灭菌锅中于0.15mpa高压条件下灭菌20min;在超净工作台上进行无菌操作,趁热先将灭菌完成后的培养基倒入无菌的培养皿中,厚度1.3cm制成平板备用;待培养基冷却至室温、培养基凝固后,接入桑黄菌丝;将接种好菌丝的平板培养皿封口倒扣放入恒温箱中,在无光或弱光,控制温度在20℃条件下进行培养,相对湿度控制在50%左右,培养7天后就开始萌发,随后以平均2.0mm/d的速度生长。


实施例3


与上述实施例不同的是,马铃薯提取液制备方法为:称取去皮土豆250g,土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在电磁炉上加热至沸腾,维持20-30min,用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤液待用。将马铃薯提取液倒入1000ml烧杯中,量取桑枝木屑提取液15g/l加入烧杯中,添加水至1000ml,将烧杯中液体倒入锅中,分别加入葡萄糖20g/l、酵母粉6.0g/l、kh2po45.0g/l、mgso4·7h2o2.0g/l、琼脂12.0g/l,用电磁炉低档加热至沸腾,期间不断搅拌,防止糊底或溢出;称取12g魔芋精粉,缓慢加入不断沸腾的液体培养中,不断搅拌,防止结块糊化;在沸腾状态下测液体培养基的ph值,用稀盐酸调节ph值至7.5;将配置好的液体培养基倒入2000ml的锥形瓶内,瓶口用棉塞塞住后,再用牛皮纸包裹棉线捆扎,放入灭菌锅中于0.15mpa高压条件下灭菌20min;在超净工作台上进行无菌操作,趁热先将灭菌完成后的培养基倒入无菌的培养皿中,厚度1.5cm制成平板备用;待培养基冷却至室温、培养基凝固后,接入桑黄菌丝;将接种好菌丝的平板培养皿封口倒扣放入恒温箱中,在无光或弱光,控制温度在22℃条件下进行培养,相对湿度控制在50%左右,培养7天后就开始萌发,随后以平均2.1mm/d的速度生长。


技术总结

本发明公开了一种桑黄菌种的培养方法,本发明采用由桑枝木屑提取液、葡萄糖、魔芋精粉等成分制成的特异培养基,能有效促使桑黄菌丝粗壮,促进菌丝生长,利用本发明技术培养的桑黄菌丝,生长繁殖速度快、繁殖能力强。


贵州鸿富鑫生态农业科技有限公司,贵州鸿富鑫菌业开发有限公司(高级农艺师,賀老师微信;hfxjy588   QQ;3312673338),西南食用菌菌种培育基地,西南食用菌研究所,西南农业科技研究所,湖北鸿富鑫生态农业科研实训基地,贵州农科院食用菌研究所,食用菌技术培训学校;培训食用菌种植,液体菌种制作接种生产及人工高产栽培技术培训班,学习各种食用菌母种+原种+栽培种制作及栽培技术;松茸菌,羊肚菌,桑黄,赛松茸,雾淞菇,虎皮侧耳,无柄球香菇,长裙竹荪,赤松茸,大球盖菇,鸡腿菇,红菇,黑皮鸡枞菌,滑子蘑,姬松茸……等菌种研发及人工高产栽培新技术,产品包销售,栽培不受地理环境限制,产量高,易管理。


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